論文分享｜群體感應(yīng)調(diào)控GefB蛋白抑制副溶血性弧菌運動及生物膜形成機制解析

發(fā)布時間：2025-02-18　來源：新芝生物　瀏覽量：0

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研究摘要

　　副溶血弧菌是導(dǎo)致食用海鮮后胃腸炎爆發(fā)的主要致病菌之一。環(huán)二鳥苷酸(c-di-GMP)是廣泛存在于細菌中的第二信使，可控制多種細菌行為，包括致病機制、生物膜的形成和運動能力。而GefB蛋白(VPA1478)以存在GGDEF結(jié)構(gòu)域為特征，可抑制副溶血弧菌的群集運動能力。研究發(fā)現(xiàn)，刪除了GefB基因的副溶血弧菌產(chǎn)生了一系列的顯著變化：c-di-GMP水平下降，生物膜形成減少，而游泳和群集運動能力卻得到了增強。進一步研究發(fā)現(xiàn)，GefB不僅參與了鞭毛相關(guān)基因的抑制，還激活了那些負責(zé)胞外多糖產(chǎn)生的基因。值得注意的是，GefB與其相鄰基因VPA1477共同構(gòu)成一個名為vpa1477-gefB的轉(zhuǎn)錄單元，并且這個單元受到兩種群體感應(yīng)調(diào)節(jié)劑AphA和OpaR的協(xié)同控制。具體來說，在細菌細胞密度較低的情況下，AphA會促進vpa1477-gefB的表達;而在高細胞密度條件下，OpaR則起到抑制作用。這一系列研究成果為我們深入理解副溶血弧菌內(nèi)部復(fù)雜的c-di-GMP代謝網(wǎng)絡(luò)及其調(diào)控機制提供了寶貴的線索。

MGC系列微生物生長曲線分析儀的應(yīng)用

　　為了確定GefB基因缺失是否會對副溶血弧菌的生長產(chǎn)生影響，研究人員使用了MGC-200微生物生長曲線分析儀進行實驗。

　　實驗中，副溶血弧菌RIMD2210633在心浸液肉湯中培養(yǎng)至OD600達到1.4，然后將該菌液作為種子菌液，以1：1000的比例接種到心浸液肉湯或者海生菌肉湯中，然后分裝到96孔細胞培養(yǎng)板，每孔含有200μL菌懸液，每個菌株設(shè)置12個生物學(xué)重復(fù)，37℃培養(yǎng)。MGC-200每30分鐘自動檢測一次OD600值，以監(jiān)測細菌的生長情況。

應(yīng)用數(shù)據(jù)